DiR小動(dòng)物活體成像熒光試劑

產(chǎn)品貨號(hào)：D2070

存儲(chǔ)條件：?20°C干燥避光

產(chǎn)品名稱(chēng): DiR (DiIC18(7)1,1’-dioctadecyltetramethyl indotricarbocyanine Iodide)

分子式/分子量: C63H101IN2=1013.4

最大吸收波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng): 748/780 nm

推薦濾光片設(shè)置：710ex/760em

結(jié)構(gòu)式：

圖 1 。取自脾臟的T細(xì)胞用DiR進(jìn)行熒光染色，然后以5×106個(gè)細(xì)胞/只小鼠的劑量經(jīng)靜脈注射到Nu/Nu小鼠體內(nèi)。圖中顯示的是注射后24小時(shí)用IVIS Spectrum拍攝的圖像，顯示細(xì)胞向脾臟遷移。

DiR染料是親脂性的近紅外花菁熒光染料，可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。18個(gè)碳的長(zhǎng)鏈插入細(xì)胞膜中從而對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，而細(xì)胞間的染料轉(zhuǎn)移可以忽略不計(jì)。DiR的發(fā)射的是近紅外熒光可以穿透細(xì)胞和組織，在活體成像中用來(lái)示蹤。DIR一般對(duì)原代細(xì)胞進(jìn)行熒光染色并可進(jìn)行活體成像分布觀察，(例如下列細(xì)胞embryonic stem cells, bone marrow derived stem cells, adipose derived stem cells, lymphocytes and erythrocytes)

圖2：將25毫克DiR溶解在3毫升乙醇中制備DiR溶液。將199微升的DiR溶液稀釋在5毫升PBS中制備320微克/毫升的工作溶液。從脾臟分離出的T細(xì)胞用320微克/毫升的DiR溶液孵育30分鐘。在4℃下以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，形成藍(lán)色沉淀。用PBS清洗兩次，然后將5×10^6個(gè)細(xì)胞通過(guò)靜脈注射注入小鼠體內(nèi)。對(duì)照組用PBS注射5×10^6個(gè)細(xì)胞。在注射后10分鐘、1小時(shí)、6小時(shí)和24小時(shí)，用IVIS光譜儀對(duì)小鼠進(jìn)行成像。DiR成像的理想濾光片設(shè)置為710納米激發(fā)和760納米發(fā)射。在所有時(shí)間點(diǎn)，小鼠均從背部和腹部進(jìn)行成像。在注射后24小時(shí)，將大腦、骨骼、脾臟、肝臟、肺部和腎臟取出進(jìn)行體外成像。

非侵入性體內(nèi)成像技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)顯示注射入體內(nèi)的T細(xì)胞向肝臟和脾臟的歸巢過(guò)程，這一過(guò)程在體外成像中也得到了證實(shí)。