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trizol pal 代氯仿試劑用于RNA提取

產(chǎn)品簡介

trizol pal 代氯仿試劑用于RNA提取。trizol pal（代氯仿試劑）可與 Trizol Reagent（貨號：R1000）配合使用，可代替氯仿，對裂解體系進行反復(fù)抽提以去除蛋白質(zhì)，用途廣泛，可從動物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中提取總 RNA。樣品在 Trizol 中被充分裂解的同時能夠最大限度地保證 RNA 的完整性。

產(chǎn)品型號：R1200

更新時間：2026-01-08

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：800

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產(chǎn)品分類

生化試劑

其他生化試劑染色劑抗生素酶和輔酶蛋白質(zhì) 緩沖液氨基酸

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品牌	LABLEAD	貨號	R1200
供貨周期	現(xiàn)貨

trizol pal 代氯仿試劑用于RNA提取貨號：R1200

存儲條件：0-30℃避光保存

trizol pal 代氯仿試劑用于RNA提取產(chǎn)品說明:

Trizol PAL 可與 Trizol Reagent（貨號：R1000）配合使用，可代替氯仿，對裂解體系進行反復(fù)抽提以去除蛋白質(zhì)，用途廣泛，可從動物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中提取總 RNA。樣品在 Trizol 中被充分裂解的同時能夠最大限度地保證 RNA 的完整性。在加入 Trizol PAL 離心后，溶液會分成三層：上層無色水相、中間層和下層紅色有機相，RNA 分布在上清層中。收集上清層后，經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到總 RNA。提取的總 RNA 完整性好，無蛋白和 DNA污染，可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實驗，如 RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、體外翻譯等。

自備試劑

Trizol Reagent（貨號：R1000）、異丙醇、75%乙醇、無 RNase 的水（新開封或提取 RNA 專用）

注意事項:

1、預(yù)防 RNase 污染，應(yīng)注意以下幾方面：

1）使用無 RNase 的塑料制品和槍頭，避免交叉污染。

2）玻璃器皿應(yīng)在使用前于 180℃高溫下干烤 4h，塑料器皿可在 0.5 M NaOH 中浸泡 10 分鐘，用水chedi沖洗后高壓滅菌。

3）配制溶液應(yīng)使用無 RNase 的水。

4）操作人員戴一次性口罩和手套，實驗過程中要勤換手套。

2、提取的樣品避免反復(fù)凍融，否則影響 RNA 提取得率和質(zhì)量。

3、本使用本制品時應(yīng)穿戴防護物品，如手套、眼罩、面罩等。如果不小心接觸到眼睛，應(yīng)立即用大量的水沖洗并前往醫(yī)院治療。使用時遠離火種、熱源。

3、保存在 75%乙醇中的 RNA 沉淀，2-8℃可以保存一周，-20℃條件下可以保存 1 年。

4、RNA 半衰期比較短，容易降解，建議提取后盡快進行后續(xù)實驗，如反轉(zhuǎn)錄成 cDNA， Northern Blot 等。

5、若下游實驗對 DNA 非常敏感，建議用不含 RNase 的 DNase I 對 RNA 進行處理。

操作步驟:

1、各種材料的處理.

1.1 植物組織：取新鮮植物組織在液氮中充分研磨或?qū)⒅参锝Mzhi剪碎后直接在 Trizol 中迅速研磨，每 30-50 mg 組織加入 1mL Trizol，混勻。

注：樣品體積一般不要超過 Trizol 體積的 10%。

1.2 動物組織：取新鮮或-70℃凍存的動物組織盡量剪碎，每 30-50 mg 組織加入 1 mL Trizol，勻漿儀進行勻漿處理?；蛟谝旱醒心ズ蠹尤?Trizol 1 mL 混勻。

注：樣品體積一般不要超過 Trizol 體積的 10%。

1.3 單層培養(yǎng)細胞：吸去培養(yǎng)液，可直接在培養(yǎng)板中加入適量 Trizol（每 10 cm2 面積需要 1 mL Trizol），用取樣器反復(fù)吹打使細胞裂解。也可用胰蛋bai酶處理后，將細胞溶液轉(zhuǎn)移至 RNase-Free 的離心管中，300×g 離心 5 min，收集細胞沉淀，仔細吸除所有上清，加入 Trizol 1 mL 混勻。

注：1）收集細胞數(shù)量不要超過 1×10 7。

2）TRNzol 加量根據(jù)培養(yǎng)板面積決定，不是由細胞數(shù)決定。如果 Trizol 加量不足，可能導(dǎo)致提取的 RNA 中有 DNA 污染。

3）收集細胞時一定要將細胞培養(yǎng)液去除干凈，否則會導(dǎo)致裂解不wan全，造成 RNA 的產(chǎn)量降低。

1.4 細胞懸液：離心收集細胞。每 5×10 6-1×10 7動物、植物和酵母細胞或每 10 7細菌細胞加入 1 mL Trizol。

注：1）加入 Trizol 前不要洗滌細胞，以免 RNA 降解。

2）一些酵母和細菌細胞可能需要勻漿儀或液氮研磨處理。

1.5 血液處理：直接取新鮮的血液，加入 3 倍體積 Trizol（推薦 0.25 mL 全血加入 0.75 mL Trizol），充分振蕩混勻。

1.6 可選步驟：對于蛋白、脂肪、多糖或胞外物質(zhì)含量高的樣品，如肌肉組織、脂肪組織或植物的塊莖，可以在勻漿處理后4℃，12,000 rpm（~13,400×g）離心 10 分鐘以除去不溶物質(zhì)，此時沉淀中含胞外物質(zhì)、多糖和高分子量的 DNA，而 RNA存在于上清中。

2、樣品中加入 Trizol 后反復(fù)吹打幾次，使樣本充分裂解。室溫放置 5 分鐘，使蛋白核酸復(fù)合物完quan分離。

3、向以上溶液中加入 Trizol Pal，每使用 1 mL Trizol 加入 0.2 mL Trizol Pal，蓋好管蓋，劇烈振蕩 15 秒，室溫放置 2-3分鐘。

4、4℃ 12,000 rpm 離心 15 分鐘，此時樣品分成三層：紅色有機相，中間層和上層無色水相，RNA 主要在水相中，把水相（約 600μL）轉(zhuǎn)移到一個新的 RNase-Free 離心管（自備）中。

5、在得到的水相溶液中加入等體積異丙醇，顛倒混勻，室溫放置 10 分鐘。

6、4℃ 12,000 rpm 離心 10 分鐘，棄上清。

7、加入 75%乙醇（用無 RNase 的水配制）洗滌沉淀。每使用 1 mL Trizol 用 1 mL 75%乙醇對沉淀進行洗滌。

8、4℃ 12,000 rpm 離心 3 分鐘，小心吸棄上清，注意不要吸棄 RNA 沉淀。

注：剩余的少量液體可短暫離心，然后用槍頭吸出，注意不要吸棄沉淀。

9、室溫放置 2-3 分鐘，晾干。加入 30-100μL 無 RNase 的水，充分溶解 RNA，得到的 RNA 保存在-70℃，防止降解。

注：沉淀不要過分干燥，以免難于溶解

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